[发明专利]一种白土苓基原植物DNA分子鉴别方法有效
| 申请号： | 201110200358.5 | 申请日： | 2011-07-18 |
| 公开（公告）号： | CN102337330A | 公开（公告）日： | 2012-02-01 |
| 发明（设计）人： | 张思巨;李进冉;仰振球;袁庆军;范圣此;海丽娜;胡红宇 | 申请（专利权）人： | 北京振东光明药物研究院有限公司;山西振东道地药材开发有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京太兆天元知识产权代理有限责任公司 11108 | 代理人： | 张韬 |
| 地址： | 100120 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 一种白土苓基原植物DNA分子鉴别方法。本发明公开一种白土苓DNA分子鉴别方法，特别是白土苓中短柱肖菝葜、华菝葜和肖菝葜中DNA分子鉴别方法。本发明是通过总DNA的提取、PCR扩增、总DNA的序列测定、DNA序列分析及植物鉴别而实现的，其中190bp的C/A替代和366-402bp37个碱基插入/缺失是短柱肖菝葜的鉴别特征位点；262-302bp40个碱基和342-350bp9个碱基的插入/缺失是华肖菝葜和肖菝葜的鉴别特征位点。本发明白土苓DNA分子鉴别方法具有高度的准确性，为白土苓的鉴别提供了快速、实用的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 白土苓基原 植物 dna 分子 鉴别方法 | ||
【主权项】：
一种短柱肖菝葜、华肖菝葜和肖菝葜的DNA分子鉴别方法，其特征在于通过如下步骤实现：(1)总DNA的提取：取待测短柱肖菝葜、华肖菝葜和肖菝葜植物叶片，提取获得总DNA；(2)PCR扩增：选取叶绿体DNA基因间序列引物引物1：Forward Primer：5’ TTGAGCTCCATCTACAAATGG 3’引物2：Reverse Primer：5’ CCCTTATCTAGCTAAAGGATT 3’进行PCR扩增，扩增结果用1.0％琼脂糖凝胶电泳检测；(3)总DNA的序列测定：PCR扩增产物直接测序；(4)DNA序列分析及植物鉴别：测序结果先用Contig Express序列比对软件校序，再用BioEdit序列编辑软件对序列进行编辑，寻找种间变异位点，结果为：其中190bp的C/A替代和366 402bp37个碱基插入/缺失是短柱肖菝葜的鉴别特征位点；262 302bp40个碱基和342 350bp9个碱基的插入/缺失是华肖菝葜和肖菝葜的鉴别特征位点。
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