[发明专利]慢病毒介导的三融合报告基因转染标记iPS细胞的方法无效
| 申请号： | 201010623576.5 | 申请日： | 2010-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN102174471A | 公开（公告）日： | 2011-09-07 |
| 发明（设计）人： | 王常勇;刘志强;王海滨;段翠密;林秋霞 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;A01K67/027;C12N15/867 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 胡长远 |
| 地址： | 100850*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种慢病毒介导的三融合报告基因标记iPS细胞的方法，主要是(1)将携带fluc-mrfp-ttk的质粒、psPAX2和pMD2G混合，将混合质粒与EntransterTM-H试剂混合，再加入293T细胞中，混合培养，离心，浓缩；(2)用胰酶消化iPS细胞，重悬；将iPS细胞接种于Matrigel胶包被的组织培养皿中培养；(3)向iPS细胞加入(1)的浓缩病毒，培养；将mrfp阳性的iPS细胞分离、纯化。本发明方法对iPS细胞进行三融合报告基因标记，可实现对动物中的iPS细胞中进行实时、定位、定量追踪检测；本发明方法对iPS细胞损伤小，转染效率高，转染效率可达25％以上。 | ||
| 搜索关键词： | 病毒 融合 报告 基因 转染 标记 ips 细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种含有三融合报告基因的iPS细胞或动物，其中所述的三融合报告基因是指fluc‑mrfp‑ttk。
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