[发明专利]一种牛奶中新霉素残留的一步ELISA检测方法无效
| 申请号： | 201010604438.2 | 申请日： | 2010-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN102128923A | 公开（公告）日： | 2011-07-20 |
| 发明（设计）人： | 匡华;胥传来;徐乃丰;屈昌龙;马伟;徐丽广;王利兵 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | G01N33/543 | 分类号： | G01N33/543;G01N21/17;G01N27/447 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所 32104 | 代理人： | 时旭丹;刘品超 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 一种牛奶中新霉素残留的一步ELISA检测方法，属于免疫分析化学技术领域。本发明采用戊二醛法将新霉素（NEO）与牛血清白蛋白（BSA）或卵清蛋白（OVA）偶联合成新霉素抗原（免疫原NEO-BSA或包被原NEO-OVA），利用红外光谱法和SDS-PAGE凝胶电泳法对NEO-BSA进行鉴定，通过免疫获得新霉素抗血清，并用间接ELISA法检测其效价，通过一步ELISA法对新霉素抗血清的特异性进行检测。本发明相对于间接竞争ELISA法，由于极大地缩短了新霉素抗体特异性的检测时间，并且具有很高的灵敏度，达到了简单、快速、灵敏的检测牛奶中的新霉素残留，可广泛的用于快速现场检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 牛奶 新霉素 残留 一步 elisa 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种牛奶中新霉素残留的一步ELISA检测方法，其特征在于包括新霉素抗原的合成与鉴定，新霉素抗血清效价的测定和新霉素抗血清特异性的检测；（1）新霉素抗原的合成利用戊二醛法合成新霉素免疫原和包被原；（2）新霉素免疫原的鉴定利用步骤（1）得到的新霉素免疫原，通过红外光谱法和十二烷基硫酸钠‑聚丙烯酰胺凝胶电泳法SDS‑PAGE对抗原进行鉴定；（3）制备新霉素抗血清利用步骤（1）得到的新霉素免疫原，通过免疫制备抗新霉素抗血清，即新霉素抗体；（4）新霉素抗体效价的测定利用步骤（3）得到的新霉素抗体，利用新霉素包被原包被酶标板，通过间接ELISA法测定新霉素抗体的效价；（5）新霉素抗体特异性的测定利用步骤（3）得到的新霉素抗体，根据步骤（4）所得新霉素抗体的效价和最适工作浓度，利用一步ELISA法检测新霉素抗体的特异性。
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