[发明专利]人乳头瘤病毒16和18型L1蛋白在酵母中的表达及应用无效
申请号: | 201010600193.6 | 申请日: | 2010-12-22 |
公开(公告)号: | CN102181426A | 公开(公告)日: | 2011-09-14 |
发明(设计)人: | 王敏文;王玉峰;周长民;闫昆明;李春明;张千;王飞宇;聂飞;周蕾;郭文军;高伟星;段广宇;李卫东 | 申请(专利权)人: | 大连雅立峰生物制药有限公司 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N15/37;C12N15/81;A61K39/295;A61P31/20 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 罗菊华 |
地址: | 116620 辽宁省*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明提供了制备针对人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的二价疫苗的方法,其包括下列步骤:优化编码HPV16和HPV18的L1蛋白的基因序列;将优化后的基因序列分别克隆入酵母表达载体以获得重组载体;用所述重组载体分别转化酵母细胞,并诱导酵母细胞高效表达L1蛋白;回收和纯化表达的HPV16和HPV18 L1蛋白,并将其与佐剂混和制备成二价疫苗。本发明还提供了分离的核酸分子,其含有经优化的编码HPV16和HPV18的L1蛋白的基因序列,以及含有此类核酸分子的载体,和含有此类载体的细胞。 | ||
搜索关键词: | 乳头 病毒 16 18 l1 蛋白 酵母 中的 表达 应用 | ||
【主权项】:
制备针对人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的二价疫苗的方法,其包括以下步骤:1)分别优化编码HPV16和HPV18的L1蛋白的基因序列,以获得经优化的HPV16和HPV18 L1基因序列,优选经优化的HPV16和HPV18的L1基因序列分别如SEQ ID NO.1和2所示;2)将步骤1)中经优化的HPV16和HPV18 L1基因序列分别克隆入酵母表达载体,以获得重组载体,优选所述酵母表达载体是pYES2;3)用步骤2)中获得的重组载体分别转化酵母细胞,并诱导酵母细胞表达HPV16和HPV18的L1蛋白,所述酵母细胞优选是酿酒酵母,更优选是酿酒酵母INVSc1或H158;4)从步骤3)的酵母细胞分别分离和纯化HPV16和HPV18的L1蛋白,并将获得的HPV16和HPV18 L1蛋白与佐剂混合制备成二价疫苗,所述佐剂优选是氢氧化铝佐剂或磷酸铝佐剂。
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