[发明专利]使人的体细胞逆向分化产生自体生殖干细胞的方法、试剂盒及其应用

摘要

本发明提供了一种使人的体细胞逆向分化产生自体生殖干细胞的方法，所述方法包括：采用含有不同植物提取物和蛋白成分的培养液分步骤培养人的体细胞，从而使所述体细胞逆向分化产生自体生殖干细胞。本发明的方法在2周内产生几百亿数量级别的第1代自体生殖干细胞。这种植物和蛋白诱导性人自体生殖干细胞具有与人自然生殖干细胞类似的细胞特异表型，并保持有相当强的扩增传代能力。本发明适用于建立新型的自体生殖干细胞库，长期永久保存自体生殖干细胞及个体遗传信息，并在再生医学的疾病治疗和抗衰老保健、自体组织器官工程和自体生殖干细胞生产的产业化领域，本发明的植物和蛋白诱导性人自体生殖干细胞具有良好的潜在应用前景。

主权项

一种使人的体细胞逆向分化产生自体生殖干细胞的方法，其中，所述方法包括：将人的体细胞在细胞培养液B1中培养2‑3天，所述细胞培养液B1为RPMI 1640，并含有淫羊藿提取物5‑100mg/ml、鹿茸提取物5‑100mg mg/ml、Y‑27632 1‑25μM、干细胞因子1‑100ng/ml、白细胞介素3 1‑100ng/ml、白细胞介素6 1‑100ng/ml；然后换用细胞培养液B2培养6‑9天，所述细胞培养液B2为RPMI 1640，并含有淫羊藿提取物5‑100mg/ml、鹿茸提取物5‑100mg/ml、水蛭提取物5‑100mg/ml、促红细胞生成素1‑100ng/ml、干细胞因子1‑100ng/ml、碱性成纤维细胞生长因子1‑100ng/ml、Y‑27632 1‑25μM、白细胞介素3 1‑100ng/ml、白细胞介素6 1‑100ng/ml、白细胞介素111‑100ng/ml，从而获得植物和蛋白诱导性自体生殖干细胞；优选地，在5％CO2和37℃条件下进行细胞培养。