[发明专利]人乳头瘤病毒16和18型L1蛋白在昆虫细胞中的表达及应用

摘要

本发明提供了制备针对人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的二价疫苗的方法，其包括下列步骤：优化HPV16和HPV18的L1蛋白的基因序列；将优化后的基因序列克隆入杆状病毒表达载体并转染昆虫细胞，以获得重组的杆状病毒；用所述杆状病毒感染昆虫细胞；回收和纯化表达的HPV16和HPV18的L1蛋白，并将其与佐剂混和制备成二价疫苗。本发明还提供了经优化的HPV16和HPV18的L1蛋白的基因序列，含有此类基因序列的载体，以及含有此类载体的细胞。

主权项

制备针对人乳头瘤病毒HPV16和HPV18的二价疫苗的方法，其包括以下步骤：1)分别优化HPV16和HPV18的L1蛋白的基因序列，优选HPV16和HPV18的L1蛋白的优化后的基因序列分别如SEQ ID NO.1和2所示；2)将步骤1)中优化后的基因序列分别克隆入杆状病毒表达载体，以获得重组质粒，优选所述杆状病毒表达载体是pAcSG2；3)用所述重组质粒，与相应的杆状病毒基因组一起，分别转染昆虫细胞，以获得重组杆状病毒，优选所述杆状病毒基因组是杆状病毒基因组AcNPV，所述昆虫细胞优选选自Sf‑9细胞、Sf‑21细胞和High Five细胞；4)用所述重组杆状病毒分别感染新鲜培养的昆虫细胞；5)从步骤4)的昆虫细胞分别分离纯化HPV16和HPV18的L1蛋白，并将其与佐剂混合制备成二价疫苗，所述佐剂优选选自氢氧化铝佐剂和磷酸铝佐剂。