[发明专利]一种简化无核葡萄胚挽救的方法

摘要

一种简化无核葡萄胚挽救的方法，通过无核葡萄胚的离体胚挽救，包括综合培养基的制备、幼果的选取、消毒、胚珠离体培养、剥胚、胚培养，选取盛花后72d的种子败育型无核葡萄幼果，流水冲洗，在超净工作台分别用升汞、酒精消毒，无菌条件下剥出胚珠。然后接种在综合培养基上，暗培养，培养基pH 5.8～6.2，培养温度25～30℃。胚珠培养40～60d时对其剥胚处理，继续接种在综合培养基上，并采用光照培养2000～4000LX，20～30d时胚开始萌发，下部逐渐发出胚根，上部逐渐长出两片子叶，最后成苗。利用本发明的方法，使发育培养基、萌发培养基、成苗培养基合为一体，简化并加速了无核葡萄胚挽救。

主权项

一种简化无核葡萄胚挽救的方法，其方法步骤是：(1)综合培养基的制备，首先选取原料硝酸钾0.095％、硝酸铵0.072％、磷酸二氢钾0.0068％、硫酸镁0.0185％、氯化钙0.0166％、硼酸0.0003％、硫酸锰0.00223％、硫酸锌0.001％、钼酸钠0.000025％、硫酸铜0.000008％、烟酸0.00005％、盐酸硫胺素0.00005％、盐酸吡哆醇0.00005％、甘氨酸0.0002％、柠檬酸铁0.001％、GA30.00001％‑0.0003％、IAA 0.00001％‑0.0003％混合成含有激素的混合母液，将混合母液中加入蔗糖0、003％‑0、006％、琼脂0.0003％‑0、0006％混合成含有激素的母液，待母液溶解完毕定容形成综合培养基，将综合培养基pH值调制5.8～6.5，然后将分装好的综合培养基放入高压灭菌锅中灭菌，灭菌条件：压强1.05MPa，温度121，灭菌时间15～20min备用；(2)选取盛花后72d的种子败育型无核葡萄幼果，流水冲洗，在超净工作台前分别用升汞、酒精消毒，无菌条件下剥出胚珠；(3)将无菌胚珠接种在综合培养基上，暗培养，培养基pH 5.8～6.2，培养温度25～30℃；(4)胚珠培养40～60d时对其剥胚处理，继续接种在综合培养基上，并采用光照培养2000～4000LX，20～30d时胚开始萌发，下部逐渐发出胚根，上部逐渐长出两片子叶，最后成苗。