[发明专利]抗J亚群禽白血病的多克隆抗体及其制备方法

摘要

本发明涉及一种抗J亚群禽白血病的多克隆抗体及其制备方法，该多克隆抗体能够有效抑制J亚群禽白血病病毒的感染。所述多克隆抗体是基于禽J亚群白血病病毒gp 37基因编码的跨膜蛋白内27个氨基酸组成的高度保守序列合成小肽，通过偶联钥孔戚血蓝素免疫兔子获得的，该多克隆抗体具有与细胞核非特异性结合阻断侵入的J亚群禽白血病病毒的复制、以及与J亚群禽白血病病毒特异性结合并予以消除的特点，有效地防治了J亚群禽白血病发生和传播，进而大幅度地降低了养禽业因J亚群禽白血病病毒感染而造成的经济损失，为禽白血病防控提供了新的方法和思路。

主权项

一种抗J亚群禽白血病的多克隆抗体及其制备方法，其特征在于：按确定的gp37基因编码的跨膜蛋白内27个氨基酸组成的高度保守序列合成免疫抑制区小肽，并且将小肽分别与钥孔戚血蓝素和牛血清白蛋白偶联，采用高效液相色谱法进行合成纯化鉴定，十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳方法鉴定偶联效果；选用1.5个月左右，雄性健壮，体重2Kg左右的新西兰大白兔，取磷酸盐缓冲溶液稀释的免疫抑制区小肽-钥孔戚血蓝素偶联物0.5-1.0ml，与等量的完全弗氏佐剂充分乳化，在兔颈部或背部皮下6-12点注射，每点0.1-0.2ml，每只兔按抗原100-500μg的剂量注射；首免3-4周后第一次加强免疫，每只兔抗原剂量同第一次免疫，用不完全弗氏佐剂充分乳化，于兔颈部或者背部皮下6-12点注射，以后每隔1-3周加强免疫1次，从第1次加强免疫开始，每次免疫后7-10天，经耳静脉或者耳动脉采血2-4ml采用间接酶联免疫吸附法测定抗体的效价，经过加强免疫检测符合要求后，颈静脉采血，分离血清获得多克隆抗体，-20℃无菌分装保存。