[发明专利]一种快速鉴定青蟹属4种青蟹的PCR方法无效
| 申请号： | 201010140012.6 | 申请日： | 2010-04-06 |
| 公开（公告）号： | CN101792809A | 公开（公告）日： | 2010-08-04 |
| 发明（设计）人： | 马洪雨;马凌波;马春艳 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院东海水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人： | 黄志达;谢文凯 |
| 地址： | 200090 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种快速鉴定青蟹属4种青蟹的PCR方法，包括：(1)4种青蟹基因组DNA的提取；(2)根据4种青蟹的线粒体COI基因核苷酸序列，设计物种特异扩增引物；(3)青蟹属4种青蟹基因组DNA的PCR扩增；(4)最后用1.5％的琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，根据产物的不同大小便可快速鉴定出这4种青蟹。该方法操作简单，安全，扩增条带清晰，结果真实可靠，可快速鉴定出青蟹属4种青蟹，广泛应用于青蟹种质资源保护、管理及遗传育种等领域。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 鉴定 青蟹属 种青蟹 pcr 方法 | ||
【主权项】：
一种快速鉴定青蟹属4种青蟹的PCR方法，包括：(1)4种青蟹的基因组DNA的提取；(2)线粒体COI基因序列分析及物种特异的引物设计引物的序列及相应的产物大小分别为：阳性对照的简并引物序列为：上游引物：Sc-F：5’-gayacdcgagcytaytttacatc-3’下游引物：Sc-R：5’-taggattwagrgayaaacckgtaaa-3’产物大小：325bp；拟穴青蟹特异的下游引物序列为：ScPa-R：5’-aacatagtggaaatgggctatg-3’产物大小：243bp；gacacacgagcctattttacatcagcaacaataatcattgctgttccaacaggaatcaaaatttttagatgactaagaactcttcatggtacacaaattaattataggccttcaatattatgagctttaggatttatcttcttatttactgttgggggtcttacaggagttgttttagctaattcatcaattgacattattctccacgatacatactatgtcatagcccatttccactatgtt；锯缘青蟹特异的下游引物序列为：ScSe-R：5’-aataaatcctaaagcccataataca-3’产物大小：138bp；gatactcgagcttattttacatcggcaacaataattattgctgttcccacaggaattaaaattttcagatgacttagaactctccatggaacacaaattaattataggccttctgtattatgggctttaggatttatt；榄绿青蟹特异的下游引物序列为：ScOl-R：5’-gtgtcatgtaggataatatcgacg-3’产物大小：212bp；gatacgcgagcttactttacatcagcaacaataattattgctgtccccacgggtatcaaaatttttagatgacttagaacccttcatggaactcaaatcaactacaggccctcaatgctttgagccttaggttttatttttttattcactgtaggtggtcttaccggagtcgttctagctaactcatccgtcgatattatcctacatgacac；(3)青蟹属4种青蟹基因组DNA的PCR扩增；(4)PCR产物电泳检测及4种青蟹的鉴定。
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