[发明专利]抗菌肽buforinⅡ和猪INF-α融合表达毕赤酵母菌及制备方法和应用有效
| 申请号： | 200910273232.3 | 申请日： | 2009-12-11 |
| 公开（公告）号： | CN101717737A | 公开（公告）日： | 2010-06-02 |
| 发明（设计）人： | 唐志如;冯泽猛;印遇龙;张友明 | 申请（专利权）人： | 中国科学院亚热带农业生态研究所 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/62;C12N15/81;C12P21/02;A23K1/16;A23K1/18;C12R1/84 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 410125 湖南省长*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种抗菌肽buforin II和猪INF-α融合表达毕赤酵母菌及制备方法和应用，毕赤酵母菌(Pichia pastoris FZM2009，CCTCC NO：M209259)。其步骤是：A、表达盒PAOX1-αFactor-IFNα-6×His-bufforin II-Zeocinr的构建；B、表达工程菌Pichia pastoris FZM2009的构建，经抗生素Zeocin筛选和PCR鉴定得到工程菌。C、融合蛋白的制备步骤是：1)在含有100μg/ml Zeocin的YPD平板上复苏；2)挑单克隆接种于含有YPD培养基中，振摇培养；3)将一体积培养物接种于十体积发酵培养基培养；4)离心，获取上清；5)加一倍体积上样缓冲液上清中，电泳检测；6)上清液过分子筛凝胶柱，收集组分；7)冷冻干燥收集的组分，得到融合蛋白；8)用肠激酶酶切融合蛋白获得buforin II和IFNα。融合表达融合蛋白buforin II和INF-α应用猪饲料。方法易行、操作简便、表达量高、成本低廉、生物学活性强。 | ||
| 搜索关键词： | 抗菌 buforin inf 融合 表达 酵母菌 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种抗菌肽buforin II和猪INF-α融合表达毕赤酵母菌：其特征在于：毕赤酵母菌Pichia pastoris FZM2009，CCTCC NO：M209259。
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