[发明专利]固定人体脑钠肽的光学敏感膜的制备方法

摘要

本发明公开了一种固定人体脑钠肽的光学敏感膜的制备方法，涉及临床医学诊断技术，该光学敏感膜可用于脑钠肽临床检测，包括选择载体、表面处理、固定捕获抗体、封闭和捕获抗原、加入荧光量子点标记的检测抗体形成双抗体夹心复合物等制备步骤，其中载体表面经过醛基化试剂处理，脑钠肽捕获抗体分子通过双功能交联剂以共价键固定于载体表面。该方法制备的敏感膜，由表面经过处理的载体、脑钠肽捕获抗体、脑钠肽抗原、以及标记有荧光量子点的脑钠肽检测抗体四部分组成，可用于定量检测人体脑钠肽含量。本发明的方法操作简单，成品使用方便，适合临床上对痕量脑钠肽的定量检测。

主权项

一种固定人体脑钠肽的光学敏感膜的制备方法，其特征在于，将载体表面进行醛基化处理后，固定脑钠肽捕获抗体，用卵清蛋白将未固定脑钠肽捕获抗体的醛基封闭，利用抗原抗体反应，将脑钠肽抗原分子的C 端区与脑钠肽捕获抗体结合，用酪蛋白将未结合脑钠肽抗原的脑钠肽捕获抗体进行封闭，在脑钠肽抗原分子内环结构端结合标记有荧光量子点的脑钠肽检测抗体；其包括步骤：(1)制备荧光量子点标记的脑钠肽检测抗体；(2)将载体表面氨基化；将氨基化的载体进行双功能试剂的交联，使其表面形成活化的醛基；(3)将脑钠肽捕获抗体固定在载体上；(4)采用卵清蛋白将载体上未参与反应的醛基封闭；(5)在载体上滴加待测脑钠肽样品溶液，37℃水浴10～120分钟；(6)采用酪蛋白将未与待测样品中脑钠肽抗原结合的脑钠肽捕获抗体进行封闭；(7)在载体上加入(1)步制备的荧光量子点标记的脑钠肽检测抗体，37℃水浴5～60分钟，形成固相抗体 抗原 荧光量子点标记检测抗体的复合物；(8)用PBST洗涤，去掉多余的未参与反应的荧光量子点标记的脑钠肽检测抗体溶液；(9)冲洗，晾干，制成成品。