[发明专利]采用转喜树aoc基因提高喜树愈伤组织中喜树碱含量的方法无效
| 申请号： | 200910047611.0 | 申请日： | 2009-03-13 |
| 公开（公告）号： | CN101831456A | 公开（公告）日： | 2010-09-15 |
| 发明（设计）人： | 孙小芬;皮妍;蒋科技;唐克轩 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人： | 吴桂琴 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属生物技术领域，涉及一种采用转aoc基因提高喜树愈伤组织中喜树碱含量的方法。本发明从喜树中克隆aoc基因，构建含aoc基因的植物表达载体，用根癌农杆菌介导，将aoc基因导入喜树细胞并再生出愈伤组织；PCR和半定量RT-PCR检测外源目的基因aoc的整合和表达情况，高效液相色谱检测器测定喜树愈伤组织中喜树碱含量，筛选喜树碱含量提高的转基因喜树愈伤组织。本发明获得的转基因喜树愈伤组织中喜树碱的含量显著提高，本发明提供了一种提高喜树细胞培养物中喜树碱含量的方法，对解决喜树碱药源匮乏、满足医药工业大规模工厂化生产需要具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 采用 喜树 aoc 基因 提高 组织 喜树碱 含量 方法 | ||
【主权项】：
一种采用转喜树aoc基因提高喜树愈伤组织中喜树碱含量的方法，其特征在于，从喜树中克隆丙二烯氧化物环化酶AOC基因，构建含aoc基因的植物表达载体，用根癌农杆菌介导，将aoc基因导入喜树幼胚并诱导出愈伤组织，PCR和半定量RT-PCR检测外源目的基因aoc的整合和表达情况，利用高效液相色谱法测定喜树愈伤组织中喜树碱的含量，筛选喜树碱含量提高的转基因喜树愈伤组织。
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