[发明专利]分子设计结合藻红胆素的藻红蓝蛋白α亚基类荧光蛋白质的制备方法无效
| 申请号： | 200910037627.3 | 申请日： | 2009-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN101824426A | 公开（公告）日： | 2010-09-08 |
| 发明（设计）人： | 佟顺刚;夏坤 | 申请（专利权）人： | 广州天宝颂原生物科技开发有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12P21/02;C12R1/89;C12R1/19 |
| 代理公司： | 广州市南锋专利事务所有限公司 44228 | 代理人： | 刘媖 |
| 地址： | 510663 广东省广州市科学*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种分子设计结合藻红胆素的藻红蓝蛋白α亚基类荧光蛋白质的制备方法，通过应用藻蓝蛋白α亚基裂合酶催化藻红胆素PEB与藻红蓝蛋白α亚基类脱辅基蛋白共价结合，制备一种新型的结合藻红胆素PEB的藻红蓝蛋白α亚基类荧光蛋白质；本发明的方法应用生物过程生产结合PEB的藻红蓝蛋白类α亚基荧光蛋白质，是一种环境友好的生产方法；藻红蓝蛋白α亚基类荧光蛋白质能应用于生物学和医药功能材料领域，特别是应用为生物学和医学检测领域的荧光探针。 | ||
| 搜索关键词： | 分子 设计 结合 藻红胆素 藻红蓝 蛋白 亚基类 荧光 蛋白质 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种分子设计结合藻红胆素的藻红蓝蛋白α亚基类荧光蛋白质的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)采用基因工程方法，将藻蓝蛋白α亚基裂合酶基因或其同源基因克隆于表达载体中，得到藻蓝蛋白α亚基裂合酶表达质粒；应用基因工程方法将藻红蓝蛋白α亚基类脱辅基蛋白基因或其同源基因克隆于第二个表达载体中，得到脱辅基蛋白表达质粒；应用基因工程方法将藻红胆素PEB生物合成酶基因或其同源基因克隆于第三个和/或第四个表达载体中，得到PEB合成质粒；(2)将藻蓝蛋白α亚基裂合酶表达质粒、脱辅基蛋白表达质粒、PEB生物合成酶质粒依次转入配套的宿主菌，当这些表达质粒都转入宿主菌后，得到相应的工程菌，应用此工程菌通过发酵工程能生产结合PEB的藻红蓝蛋白α亚基类荧光蛋白质，发酵后，按常规蛋白质提纯技术，可提纯得到相应的结合PEB的藻红蓝蛋白α亚基类荧光蛋白质。
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