[发明专利]一种添加乙醇和/或过氧化氢胁迫枯草芽孢杆菌发酵产过氧化氢酶的方法

摘要

一种添加乙醇和/或过氧化氢胁迫枯草芽孢杆菌发酵产过氧化氢酶的方法，属于微生物发酵产酶技术领域。本发明利用枯草芽孢杆菌Bacillus sp.WSHDZ-01为生产菌株，通过在培养基中添加乙醇和/或过氧化氢，胁迫菌体产过氧化氢酶。过氧化氢酶产量从未胁迫前的6060U·ml^-1提高到15000U·ml^-1，3l罐过氧化氢酶产量达28000U·ml^-1。利用此方法生产的过氧化氢酶可应用于纺织前处理。

主权项

1、一种添加乙醇和/或过氧化氢胁迫枯草芽孢杆菌Bacillus sp.WSHDZ-01发酵产过氧化氢酶的方法，其特征是利用Bacillus sp.WSHDZ-01为生产菌株，通过在培养基中添加乙醇和/或过氧化氢，胁迫菌体产过氧化氢酶；添加方式为：在发酵开始后0h、12h、36h分批添加培养基中体积浓度达1.0％的乙醇，总酶活达15000U·mL-1；3L罐上采取不同的乙醇添加策略使CAT酶活大幅提高：分阶段恒速流加体积浓度5％的乙醇，滴加速度为：0-12h以4.13mL/h，12-36h以10.05mL/h 36h至发酵结束以11.42mL/h滴加；或0h、12h、36h分批添加培养基中体积浓度达1.0％的乙醇；或0h一次性添加培养基中体积浓度达1.0％的乙醇；CAT最高酶活分别达28000U·mL-1，25000U·mL-1和22000U·mL-1；或在发酵开始后12h在培养基中添加培养基中体积浓度达0.3％的H2O2，总酶活达9200U·mL-1；3L罐上在发酵开始后12h一次性添加培养基中体积浓度达0.3％的H2O2，酶活可达21600U·mL-1，或12h、24h分批添加培养基中体积浓度达0.15％的H2O2，总酶活达23000U·mL-1；或在3L罐上分阶段恒速流加体积浓度5％的乙醇，滴加速度为：0-12h以4.13mL/h，12-36h以10.05mL/h，36h至发酵结束以11.42mL/h滴加和同时在12h、16h、20h、24h、28h分批添加培养基中体积浓度达0.06％的H2O2；总酶活达19000U·mL-1，其中胞外酶活达15700U·mL-1，占总酶活的82.6％，发酵时间缩短到42h。