[发明专利]一种高效液相色谱法分离分析阿魏酸丁酸甘油酯的方法

摘要

本发明涉及一种高效液相色谱法分离分析阿魏酸丁酸甘油酯的方法，包括：(1)预处理：在亚硫酰氯催化下，阿魏酸与无水乙醇回流加热反应，溶于乙醚，碳酸氢钠萃取，得阿魏酸乙酯；在30～50℃下，叔丁醇为反应介质，将阿魏酸乙酯、丁酸甘油酯和Novozym435脂肪酶在空气浴振荡反应，得阿魏酸丁酸甘油酯；取上述产品溶于甲醇，过滤，再经HPLC级甲醇稀释；(2)分离分析：采用色谱柱(Ph－3 column Inertsil，ID×250mm)，柱温为室温。固定相采用硅胶填料，紫外检测波长280～325nm；流动相为甲醇与水的梯度混合；进样量5μL，流速1mL/min。本发明方法根据待分离物质的性质选择色谱柱填料和特定紫外扫描波长，快速、高效、准确，便于工业分析应用。

主权项

1.一种高效液相色谱法分离分析阿魏酸丁酸甘油酯的方法，包括：(1)预处理：在亚硫酰氯SOCl2(3mL)催化下，阿魏酸(1-5g)与无水乙醇(10-50mL)于60-80℃温度下回流加热反应后，溶于乙醚(10-30mL)，饱和碳酸氢钠萃取，室温静止析出结晶，得阿魏酸乙酯；在30～50℃温度下，以5mL叔丁醇为反应介质，将1～2.0mmoL纯化的阿魏酸乙酯、2～4.0mmoL丁酸甘油酯和100～150mg Novozym435脂肪酶，在摇床转速150-210rpm，空气浴振荡反应80～120h，再经后处理，得到不同形式阿魏酸丁酸甘油酯；取上述阿魏酸丁酸甘油酯1mg溶于1mL甲醇，通过0.45μm孔径的微孔滤膜过滤后，再取10μL，用HPLC级甲醇稀释至1mL，待用；(2)分离分析：采用的色谱柱(Ph-3 column Inertsil，ID×250mm)，柱温为室温。固定相采用硅胶填料，紫外检测；流动相为甲醇与水的梯度混合，梯度洗脱程序：0-5min内保持50％甲醇，5-15min内甲醇浓度从50％逐渐变成100％，保持10min；进样量5μL，流速1mL/min。