[发明专利]一种双荧光蛋白分子细胞标记的方法无效
| 申请号： | 200810036837.6 | 申请日： | 2008-04-30 |
| 公开（公告）号： | CN101570758A | 公开（公告）日： | 2009-11-04 |
| 发明（设计）人： | 杨淑伟;黄文韬 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/65;C12N5/10 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人： | 缪利明 |
| 地址： | 200031*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种用于双荧光蛋白分子标记法方法的重组质粒和双荧光蛋白分子细胞标记的方法，本发明提供的重组质粒包含编码标签蛋白A的片段A，其5’端或3’端融合编码待检测蛋白C的序列C；编码标签蛋白B的片段B，其5’端或3’端融合编码待检测蛋白D的序列D；片段A-C与B-D由IRES序列E连接；和在片段AC的上游的启动子；本发明提供的标记方法包括构建用于双荧光蛋白分子标记法方法的重组质粒、细胞转染和荧光标记步骤。使用本发明提供的重组质粒和标记方法，可在同一个载体中共表达两个目的基因，同时标记同一细胞中的两个不同蛋白；而且，标记过程简单，快速，比传统的抗体荧光标记方法大大节省了标记的时间。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 荧光 蛋白 分子 细胞 标记 方法 | ||
【主权项】：
1、一种用于双荧光标记方法的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒包括：1)编码标签蛋白A的DNA片段A，该标签蛋白可以特异地与其荧光底物共价结合，其5’端或3’端融合一段编码待检测蛋白C的DNA序列C，组成片段AC；2)编码标签蛋白B的DNA片段B，该标签蛋白可以特异地与其荧光底物共价结合，其5’端或3’端融合一段编码待检测蛋白D的DNA序列D，组成片段BD；3)所述片段AC与BD由一段编码内部核糖体插入位点元件的双顺反子ORF表达系统的DNA序列E连接；4)在所述片段AC的上游的合适位置的一段负责所述片段AC、E和BD的转录控制的启动子。
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