[发明专利]一种低温保存刺激隐核虫滋养体和包囊的方法无效
| 申请号： | 200810027546.0 | 申请日： | 2008-04-22 |
| 公开（公告）号： | CN101260367A | 公开（公告）日： | 2008-09-10 |
| 发明（设计）人： | 李安兴;但学明 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C12N1/10 | 分类号： | C12N1/10;C12R1/90 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 510275广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种低温保存刺激隐核虫滋养体和包囊的方法，包括：(1)采集刺激隐核虫的滋养体和包囊，在8－15℃下保存于人工气候箱中，相对湿度90％，按12hr黑暗/12hr光照。每隔5d换一次灭菌海水，换水量20％；(2)每月对低温保存的滋养体和包囊进行检测1次，测定其在温度回复至27.0℃时的孵化率和孵出幼虫的感染力。用本发明的方法来保存刺激隐核虫的滋养体和包囊，可以使保存了4个月的滋养体和保存了3个月的包囊还能孵出具有感染力的幼虫，这些幼虫在条件合适的情况下能繁殖出大量的后代，而且后代的毒力没有下降。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 低温 保存 刺激 隐核虫 滋养 包囊 方法 | ||
【主权项】：
1.一种低温保存刺激隐核虫滋养体和包囊的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)刺激隐核虫的滋养体和包囊的保存方法采集刺激隐核虫的滋养体和包囊，在8-15℃下保存于人工气候箱中，相对湿度90％，光照12hr黑暗/12hr光照。为了确保保存条件一致，把所有装有寄生虫的24孔组织培养板和培养皿一起放入一个10L的烧杯中，加入5L灭菌海水，保持微量充气，每隔5天换一次灭菌海水，换水量2L；培育寄生虫的海水先过滤，再于120℃中灭菌30分钟，使用前加入100IU/ml的青霉素和I00ul/ml的链霉素。(2)低温保存刺激隐核虫的滋养体和包囊方法的有效性检验每隔1个月检测一次滋养体和包囊在27.0℃的孵化率和孵出幼虫的感染力。结果发现，在8-15℃保存了4个月的滋养体和保存了3个月的包囊还能孵出具有感染能力的幼虫，这些幼虫在条件合适的情况下能繁殖出大量的后代，而且后代的毒力没有下降。
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