[发明专利]LKB1基因Thr336磷酸化多克隆抗体制备方法及在肿瘤发生中检测的应用无效
| 申请号： | 200810020487.4 | 申请日： | 2008-03-05 |
| 公开（公告）号： | CN101235087A | 公开（公告）日： | 2008-08-06 |
| 发明（设计）人： | 黄蓓;任艳敏;魏皓;左慢慢 | 申请（专利权）人： | 黄蓓 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;G01N33/574 |
| 代理公司： | 安徽合肥华信知识产权代理有限公司 | 代理人： | 余成俊 |
| 地址： | 230039安徽省合*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种LKB1基因Thr336磷酸化多克隆抗体制备方法及在肿瘤发生中检测的应用，其抗体制备是通过生物信息学方法选取LKB1基因的Thr336位点附近10个氨基酸WRSMTpVVPYL，且使Thr336位点磷酸化，并铰链上BSA，以此为Thr336－p－LKB1抗原，对兔子进行免疫获得Thr336－p－LKB1抗血清；用Thr336－p－LKB1抗原条进行抗血清纯化；Thr336－p－LKB1抗体阴性对照的底物为融合表达蛋白His－LKB1，阳性对照的底物为Thr336－p－LKB1抗原肽段，商品非磷酸化LKB1抗体不仅识别His－LKB1蛋白而且识别p－LKB1(Thr336)肽段，而本发明的p－LKB1(Thr336)抗体仅识别p－LKB1(Thr336)抗原。为LKB1蛋白功能研究和肿瘤诊断提供有力工具。 | ||
| 搜索关键词： | lkb1 基因 thr336 磷酸化 克隆 抗体 制备 方法 肿瘤 发生 检测 应用 | ||
【主权项】：
1、LKB1基因Thr336磷酸化多克隆抗体制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)、通过生物信息学方法选取LKB1基因的Thr336位点附近10个氨基酸WRSMTpVVPYL，且使Thr336位点磷酸化，并铰链上BSA以增强其抗原性，以此为Thr336-p-LKB1抗原，对兔子进行免疫获得Thr336-p-LKB1抗血清；(2)、用Thr336-p-LKB1抗原条进行抗血清纯化：(3)、制备的抗血清通过Western blot检测抗体效价及特异性检测，Thr336-p-LKB1抗体阴性对照的底物为融合表达蛋白His-LKB1，阳性对照的底物为Thr336-p-LKB1抗原肽段。
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