[发明专利]添加α－酮戊二酸脱氢酶抑制剂实现α－酮戊二酸过量积累的方法有效
| 申请号： | 200810020039.4 | 申请日： | 2008-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN101250563A | 公开（公告）日： | 2008-08-27 |
| 发明（设计）人： | 陈坚;张旦旦;刘立明;堵国成 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12P7/50 | 分类号： | C12P7/50;C12R1/645 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所 | 代理人： | 时旭丹;刘品超 |
| 地址： | 214122江苏省无锡市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 一种添加α－酮戊二酸脱氢酶抑制剂实现α－酮戊二酸过量积累的方法，属于蛋白质水平的代谢调控优化发酵过程技术领域。本发明利用多重维生素营养缺陷型的光滑球拟酵母CCTCC M202019为生产菌株，通过在培养基中添加α－酮戊二酸脱氢酶抑制剂：过氧化氢、甲氨蝶呤、次氯酸钠或羟基硫氨，调节α－酮戊二酸脱氢酶活性，有目的的降低α－酮戊二酸脱氢酶活性，减少代谢过程中α－酮戊二酸的降解，达到过量积累α－酮戊二酸的目的。本发明利用调控工业微生物中碳代谢和碳代谢流流向分布，使碳代谢流截止在α－酮戊二酸这一节点上，其中α－酮戊二酸最大产量达到23.2g/L，比对照提高了12.2％。本发明为TCA循环中间代谢产物的发酵研究提供了一个新的思路。 | ||
| 搜索关键词： | 添加 酮戊二酸 脱氢酶 抑制剂 实现 过量 积累 方法 | ||
【主权项】：
1、一种添加α-酮戊二酸脱氢酶抑制剂实现α-酮戊二酸过量积累的方法，其特征是利用多重维生素营养缺陷型的光滑球拟酵母(T.glabrata)CCTCCM202019为生产菌株，通过在培养基中添加α-酮戊二酸脱氢酶抑制剂：过氧化氢、甲氨蝶呤、次氯酸钠或羟基硫氨，调节α-酮戊二酸脱氢酶活性，有目的的减少α-酮戊二酸的降解，使碳流截止在α-酮戊二酸这一节点上，实现α-酮戊二酸过量积累；调控方法为：发酵40h，在发酵培养基中添加过氧化氢达5mM时，α-酮戊二酸积累量达到23.2g/L；或发酵初期0h，在发酵培养基中添加甲氨蝶呤达0.08μM时，α-酮戊二酸积累量达到22.7g/L；或发酵初期0h，在发酵培养基中添加次氯酸钠达0.4mM时，α-酮戊二酸积累量达到22.2g/L；或发酵初期0h，在发酵培养基中添加羟基硫氨达0.48μM时，α-酮戊二酸积累量达到22.0g/L。
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