[发明专利]利用博德特氏菌转化胆固醇生产低分子量透明质酸的方法无效
| 申请号： | 200810015482.2 | 申请日： | 2008-04-02 |
| 公开（公告）号： | CN101250569A | 公开（公告）日： | 2008-08-27 |
| 发明（设计）人： | 宋欣;林彦良;林建强;曲音波 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12P19/04 | 分类号： | C12P19/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 济南金迪知识产权代理有限公司 | 代理人： | 许德山 |
| 地址： | 250100山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用博德特氏菌转化胆固醇生产低分子量透明质酸的方法，其涉及的步骤为：(1)菌种选择；(2)斜面培养；(3)种子培养；(4)扩大培养；(5)收集发酵产物；(6)低分子量透明质酸分离；(7)乙醇沉淀；(8)产物干燥。本发明利用微生物转化胆固醇生成重要的甾体类药物的过程中，同时获得高附加值的低分子量透明质酸，工艺步骤简单，成本低，产率较高，具有重要的理论意义和极好的市场前景，能产生巨大的经济效益。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 博德特氏菌 转化 胆固醇 生产 分子量 透明 方法 | ||
【主权项】：
1. 利用博德特氏菌转化胆固醇生产低分子量透明质酸的方法，其特征在于，所述方法涉及的工艺步骤如下：(1)菌种选择：选用博德特氏菌(Bordetella sp.)B4 CGMCC No.2229；(2)斜面培养：将上述菌种接种于固体斜面基本无机盐培养基上，25～37℃条件下，静止培养24～72小时；(3)种子培养：取步骤(2)培养后的菌株在无菌条件下用接种环接1～2环于20～100mL含有质量百分比为0.01％～1.0％胆固醇的基本无机盐培养基中，25～37℃条件下，振荡培养24～72小时，制得种子液；(4)扩大培养：以体积百分比为2％～10％的接种量，将上述种子液接种于50～1000mL含有质量百分比为0.1％～1.0％的胆固醇的基本无机盐培养基中，25～37℃条件下，振荡培养48～144小时；(5)收集发酵产物：将步骤(4)所得的发酵液以2000～8000rpm转速离心10～30分钟，收集上清液，上清液即含低分子量透明质酸；(6)低分子量透明质酸分离：将步骤(5)中获得的上清液利用超滤的方法浓缩至1～10ml，通过离子交换层析获得含低分子量透明质酸的溶液；(7)乙醇沉淀：将步骤(6)中获得的含低分子量透明质酸的溶液用3倍体积的无水乙醇沉淀，收集沉淀即得低分子量透明质酸；(8)干燥：将步骤(7)中获得的低分子量透明质酸沉淀置于100℃烘箱中干燥，得固体低分子量透明质酸。
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