[发明专利]一种以高效氯氟氰菊酯为底物的降解菌株的筛选方法有效
| 申请号： | 200810010695.6 | 申请日： | 2008-03-19 |
| 公开（公告）号： | CN101538605A | 公开（公告）日： | 2009-09-23 |
| 发明（设计）人： | 张惠文;王秀娟;李旭;苏振成;张晓黎;张成刚 | 申请（专利权）人： | 中国科学院沈阳应用生态研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/04 | 分类号： | C12Q1/04;C12N1/02 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 | 代理人： | 许宗富;周秀梅 |
| 地址： | 110016辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明属于生物降解农药残留领域，具体地说是一种以高效氯氟氰菊酯为底物的降解菌株的筛选方法。所述筛选方法为将采集的菌样富集驯化、筛选、分离纯化、强化得到以高效氯氟氰菊酯为唯一碳源生长的降解菌的方法。本发明提供的方法能高效，便捷地筛选出目的活性降解菌。为制备相关降解菌剂、酶制剂提供了菌种资源。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 氯氟氰菊酯 降解 菌株 筛选 方法 | ||
【主权项】：
1.一种以高效氯氟氰菊酯为底物的降解菌株的筛选方法，其特征在于：1)菌样的富集驯化：将5-10g菌样接种于含高效氯氟氰菊酯的80-100ml富集培养基中进行转接培养，每次转接培养条件为25-30℃、130-200r/min摇床培养5-10天，共转接4-7次，转接量按体积百分比计每次培养液5-10％接种于含高效氯氟氰菊酯逐渐增加的80-100ml富集培养基中，待用；其中高效氯氟氰菊酯首次加入量25mg/L，而后以25-50mg/L逐渐增加，菌样首次加入富集培养基中同时加入10-20粒玻璃珠；2)筛选：按体积百分比5-20％的接种量将步骤1)中的富集培养菌液接种于含终浓度为50-150mg/L高效氯氟氰菊酯的60-100ml基础培养基中，进行转接培养，每次转接培养条件为25-30℃下以130-200r/min摇床培养5-10天，共转接4-7次，得到以高效氯氟氰菊酯为唯一碳源的混合菌液，待用；3)分离纯化：将筛选所得的以高效氯氟氰菊酯为唯一碳源的混合菌液稀释105-109倍，涂布于普通培养基上，于25-30℃培养2-4天，分别挑取形态不同的菌落在普通培养基上划线纯化；4)强化：将步骤3)中分离纯化好的单一菌株划线到含终浓度为50-150mg/L的高效氯氟氰菊酯的基础培养基平板上，在25-30℃下培养3-5天，得到以高效氯氟氰菊酯为底物的降解菌株。
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