[发明专利]快速定量检测活的双歧杆菌的方法

摘要

快速定量检测活的双歧杆菌的方法。本发明涉及一种用于含双歧杆菌制品中活的双歧杆菌的快速定量检测方法。双歧杆菌的检测技术分为：传统的平板菌落计数为基础的检测和分子生物学为基础的各种检测。本方法：取样将样品10倍稀释后，进行EMA处理，提取样品的DNA，分子信标－实时PCR检测，根据标准曲线计算双歧杆菌的含量，DNA提取过程是：EMA处理后的样品，加18％的柠檬酸钠和1M NaOH，10000rpm离心10min，收集菌体细胞，超纯水洗涤后，取菌悬液，加入浓度为2％的Tritox－100液中，100℃水浴处理10min后，立即冷却，上清液用于分子信标－实时PCR扩增。本发明用于含双歧杆菌的制品中活的双歧杆菌的定量检测。

主权项

1.一种快速定量检测活的双歧杆菌的方法，其特征是：取样后，将样品10倍稀释后，进行EMA处理，然后提取样品的DNA，进行分子信标-实时PCR检测，根据标准曲线计算双歧杆菌的含量，所述的DNA提取过程是：EMA处理后的含双歧杆菌制品，加入18％的柠檬酸钠和1M NaOH，10000rpm离心10min，收集菌体细胞，用无菌超纯水洗涤后，悬浮于无菌超纯水中，取菌悬液，加入到浓度为2％的Tritox-100液中，100℃水浴处理10min后，立即置于冰水中冷却，所得上清液直接用于分子信标-实时PCR扩增，所述的含双歧杆菌制品的重量份数为1，所述的柠檬酸钠的重量份数为0.15，所述的NaOH的重量份数为0.1，所述的无菌超纯水的重量份数为0.1，所述的菌悬液的重量份数为0.01，所述的Tritox-100液的重量份数为0.1。