[发明专利]发酵生产低神经酸、EPA含量的花生四烯酸油脂的方法

摘要

本发明涉及一种生产含低神经酸、低二十碳五烯酸(EPA)的花生四烯酸油脂的方法。本发明的方法选用深黄被孢霉为出发菌株，经菌种活化、摇瓶菌种制备、发酵，收获菌体，从菌体中回收提取低神经酸、EPA含量的花生四烯酸油脂。采用深黄被孢霉作为发酵生产菌种，油脂生产能力可以提高1－3倍，花生四烯酸产量可以提高1－3倍；发酵条件简单，发酵过程利于控制；可以获得高品质的花生四烯酸混合油脂；低神经酸、低二十碳五烯酸(EPA)。

主权项

1.发酵生产低神经酸、EPA含量的花生四烯酸油脂的方法，其特征在于它包括如下步骤：1)、菌种活化：制备活化培养基：200g马铃薯，水1000ml，10-20g葡萄糖，17-20g琼脂，5-10g氮源；所述的氮源为酵母膏、酵母粉、花生粉、牛肉膏、蛋白胨、鱼粉、硝酸钾或硝酸钠；将深黄被孢霉(Mortierella isabellina)在活化培养基斜面进行菌种活化培养，25-28℃，培养箱湿度40-50％，培养3-4天，得活化菌种，备用；2)摇瓶菌种制备：将活化培养基上的活化菌种用无菌水振荡洗脱后接入种子培养基摇瓶中，种子培养基摇瓶中有摇瓶培养基；摇瓶培养基配方为：18-20g/L葡萄糖，10-15g/L酵母膏；通入压缩空气，通气量为0.4-0.6VVM，摇床转速为100-250rpm，培养温度为20-30℃，振荡培养3-5天；从培养箱中取出后置于4-10℃条件下保持60-120min，得摇瓶菌种，备用；3)发酵：将制得的摇瓶菌种接种于有发酵培养基的摇瓶或发酵罐中进行发酵培养，接种量为摇瓶菌种所占发酵培养基体积的8-20％，发酵培养基配方为：碳源10-30g/L，氮源10-21g/L；用1-5mol/L的酸或碱调节pH至5.5-7；通入洁净压缩空气，通气量为0.4-0.6VVM；转速100-200rpm，压力0.01-0.05Mpa，温度20-30℃，期间每隔24h补充10g/L的碳源，每48h补充1g/L的硝酸钠，发酵培养7-9天，收获菌体，从菌体中回收提取低神经酸、EPA含量的花生四烯酸油脂。