[发明专利]一种治疗眼疾近视及视疲劳中药制剂的质量检测方法

摘要

本发明属中药成方制剂领域，具体来说是涉及一种治疗眼疾近视及视疲劳中药制剂的质量检测方法。本发明提供了对丹皮酚、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、芍药苷、丹参素钠、淫羊藿苷的定性鉴别，制定出了最佳的供试品制备方法，找到了合适的展开剂，能对该制剂进行有效的定性鉴别。此外本发明提供了盐酸小檗碱的含量测定方法，因为盐酸小檗碱与其它组份分离度、重现性、精密度、回收率好，所以采用高效液相色谱法测定本品中盐酸小檗碱的含量，制定出了最佳的供试品制备方法和流动相配制方法，大大提高了盐酸小檗碱的含量检测准确度。本方法的建立，有利于市场上对治疗眼疾近视及视疲劳中药制剂的真伪优劣进行鉴别。

主权项

1、一种治疗眼疾近视及视疲劳中药制剂的质量检测方法，将板蓝根、僵蚕粉碎成细粉，备用；将牡丹皮、何首乌、关黄柏、赤芍粉碎成细粉，其余枸杞子、菟丝子、女贞子、茺蔚子、山茱萸、淫羊藿、谷精草、木贼、决明子、川芎、丹参、地黄、红花、鸡血藤十四味，加水煎煮三次，第一次加水8倍量，浸泡30分钟，煎煮1小时，第二、三次各加水6倍量，煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至60℃时相对密度为1.30的稠膏，加入上述药材细粉，混合，60℃时干燥，粉碎成细粉，制成颗粒，干燥，冰片研细，加入上述颗粒中，混匀，即得，其特征在于包括以下步骤：(1)取本品5g，研细，加乙醚50ml，低温回流提取30分钟，放冷，滤过，滤液浓缩至10ml，作为供试品溶液；另取冰片对照品，加乙醚制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液2μl、对照品溶液4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1∶1的60-90℃石油醚-甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取鉴别(1)项下的供试品溶液，自然挥干乙醚，残留物加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以3∶1环己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本品10g，研细，加正己烷30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至0.5ml，作为供试品溶液；另取决明子对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取大黄酚对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶5∶1的30-60℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；(4)取本品10g，研细，加甲醇40ml，置水浴中加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，再加盐酸2ml，置水浴上加热30分钟，立即冷却，用乙醚分两次提取，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液；另取何首乌对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取大黄素、大黄素甲醚对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶5∶1的30-60℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；(5)取本品10g，研细，加乙酸乙酯30ml，温水浴上回流提取1小时，放冷，滤过，弃去乙酸乙酯液，残渣挥去溶剂，加乙醇30ml回流提取1小时，滤过，滤液浓缩至5ml，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三5∶1氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(6)取本品5g，研细，加水15ml使溶解，加稀盐酸调节PH值至2，加乙酸乙酯30ml，振摇提取，提取液置水浴上蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参素钠对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以25∶10∶4三氯甲烷-丙酮-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(7)取本品10g，研细，置索氐提取器中，加70％乙醇回流提取至无色，提取液水浴蒸去乙醇，加热水15ml，混匀，趁热滤过，滤液移至分液漏斗中，加三氯甲烷振摇提取3次，第一次15ml，第二次10ml，第三次10ml，三氯甲烷液弃去，水液用水饱和的正丁醇振摇提取5次，分别为15、15、10、10、10ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤5次，每次15ml，继用正丁醇饱和的水25ml洗涤；分取正丁醇液，水浴蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以1.3∶1∶1乙酸丁酯-甲酸-水10℃以下放置的上层液为展开剂，预饱和15分钟，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铝乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在365nm紫外光灯下检视，显相同颜色的荧光斑点；(8)盐酸小檗碱含量测定：对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加100∶1的甲醇-盐酸溶液至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加100∶1的甲醇-盐酸溶液至刻度，摇匀，即得每1ml中含盐酸小檗碱0.01mg对照品溶液；供试品溶液的制备：取本品装量差异项下的内容物，混匀，取约1.0g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入100∶1的甲醇-盐酸溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以50∶25∶25的乙腈-0.1mol/L的磷酸二氢钠-0.025mol/L的十二烷基磺酸钠为流动相；检测波长为265nm；理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，计算样品中盐酸小檗碱的含量。