[发明专利]一种海参用球形红假单胞菌的培养方法

摘要

本发明涉及海洋微生物，是一种海参用球形红假单胞菌的培养方法。将球形红假单胞菌，经过液体一级种子培养、液体二级扩繁培养和三级大批量生产性培养，再经离心浓缩制成高浓度的海参用球形红假单胞菌产品。培养液含球形红假单胞菌≥20亿个活菌/ml；浓缩制成的产品含球形红假单胞菌≥100亿个活菌/ml。本发明采用菌种为常规的海参用球形红假单胞菌，并以陈海水、螯合铁、乙酸钠等为主要原料，在厌氧、光照1000－10000Lux、15℃～32℃条件下进行液体培养，该生产工艺操作简便，周期短、产品质量高。在海参育苗和养成中应用，可提高海参幼体各阶段变态率、成活率，能促进海参的生长发育，并改善养殖池水体的生态环境，净化水质。

主权项

1.一种海参用球形红假单胞菌的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：1)菌种活化：将经过活化的球形红假单胞菌斜面菌种接种于液体培养基中，经培养，得到球形红假单胞菌种子母液；2)一级种子培养：将步骤1)中得到的种子母液接种到一级种子培养基中，种子母液与一级种子培养液的重量百分比为20-25∶75-80，经培养得到一级种子液；3)二级扩繁培养：将步骤2)中得到的一级种子液接种到二级扩繁培养基中，一级种子液与扩繁液体培养液的重量百分比为20-25∶75-80，经培养得到二级种子液；4)三级大批量生产性培养：将步骤3)中得到的二级种子液接种到三级大批量生产性培养基中，二级种子液与三级大批量生产性培养液的重量百分比为30-35∶65-70；经培养，即得到液体状，呈粉色、红色和紫红色，菌体大小为1.0～1.5μm或1.0～1.1μm，含活菌数≥20亿个/ml的海参用球形红假单胞菌的菌液；上述球形红假单胞菌培养过程所采用的培养基组成均为：氯化铵1.0-3.0g、乙酸钠2.0-5.0g、硫酸镁0.2-0.3g、碳酸氢钠1.0-3.0g、磷酸氢二钾0.2-0.5g、酵母膏1.0-3.0g、微量元素母液1-3ml、陈海水1000ml，其中含有螯合铁5-10ppm、PH值自然；培养条件均为：厌氧、光照1000-10000 Lux、培养6-8天；所述陈海水为天然海水放置阴凉处储放1-2周，待杂质沉淀后过滤而成，盐度为2.0-3.0％。