[发明专利]一种烟草黑胫病抗性的苗期鉴定方法

摘要

本发明公开了一种烟草黑胫病抗性的苗期鉴定方法，从感病烟茎上分离病原菌，经纯化、培养后得到黑胫病接种体。将接种体接种至待测烟苗的茎基部，并分别于接种后的第5天、第7天和第10天各记录一次病指，以三次病指的平均值作为测试品种的抗性指标。本发明率先实现了用苗期鉴定结果替代传统大田鉴定结果，有效避免外部环境对鉴定结果的影响，提高了烟草黑胫病抗性鉴定的准确性。该方法从育苗到鉴定完成只需65天左右，大幅度地缩短了鉴定时间。其操作简便，成本低廉，鉴定结果真实可靠，具有良好的市场应用前景。

主权项

1、一种烟草黑胫病抗性的苗期鉴定方法，包括以下顺序的步骤：①病原菌分离在基础培养基中加入利福平原液，制成利福平培养基备用；采集烟草黑胫病症状典型的感病烟茎，取病茎表皮疑病组织数块，切成长1～2cm的小块，置于利福平培养基上，经培养、纯化后得到烟草黑胫病菌丝体，在室温条件下，保存于灭菌蒸馏水中备用；②黑胫病接种体的制备将烟草黑胫病菌丝体移入燕麦培养液中培养5～7天后，转入菌谷培养基上培养18～20天得到黑胫病接种体；③病圃设计及管理将苗龄45～55天的待鉴定烟苗移栽至温室病圃，烟苗在病圃内随机排列，设3次重复，每重复植烟10株，按常规温室管理技术进行管理；以小黄金1025为感病对照，红花大金元为感病辅助对照，金星6007为中抗对照，革新3号为抗病对照；④菌谷接种烟苗移栽5～7天后，将经步骤(2)培养得到的接种体接种至待测烟苗的茎基部，接种量为0.5g/株；接种后立即覆土并并灌水15～20cm，保持24～48小时；⑤鉴定与分级在温室病圃中，分别于接种后的第5天、第7天和第10天各记录一次病指，以三次病指的平均值作为测试品种的抗性指标；进而按国家标准对鉴定品种进行分级。