[发明专利]一种AT选择性高频率诱变的方法无效
申请号: | 200610018256.0 | 申请日: | 2006-01-19 |
公开(公告)号: | CN1807618A | 公开(公告)日: | 2006-07-26 |
发明(设计)人: | 刘子铎;张炼辉;洪玉枝;喻子牛 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430070湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种AT选择性高频率诱变方法。其步骤包括以dUTP为媒介进行第一轮PCR扩增,得到含dUMP的杂合DNA分子;以该DNA分子为模板,进行第二轮PCR扩增;通过部分U与G配对,获得AT碱基分别被GC替换的突变DNA分子或者在第一轮PCR扩增后,以含有dUMP的杂合DNA分子为模板,在0.5mMMgcl2存在下进行在第二轮PCR扩增,获得高突变频率的DNA分子。本发明的AT选择性诱变方法突变频率为0.86%.其中AT转换为其它碱基数占总突变碱基数的96.5%;高频率诱变方法的突变率为 4.0%。其中AT转换为其它碱基数占总突变碱基的90.4%。本发明的方法可用于DNA分子的体外改良。 | ||
搜索关键词: | 一种 at 选择性 频率 诱变 方法 | ||
【主权项】:
1、一种AT选择性高频率诱变的方法,其特征在于,以dUTP为媒介进行第一轮PCR,得到含dUMP的杂合DNA分子;以该DNA分子为模板,进行第二轮PCR;通过部分U与G配对,获得AT碱基分别被GC替换的突变DNA分子。
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