[发明专利]基于酶循环的α－甲基酰基辅酶A消旋酶的检定法无效
| 申请号： | 200580035331.8 | 申请日： | 2005-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN101040055A | 公开（公告）日： | 2007-09-19 |
| 发明（设计）人： | 袁崇生 | 申请（专利权）人： | 通用原子公司 |
| 主分类号： | C12Q1/26 | 分类号： | C12Q1/26;C12Q1/00;G01N33/53 |
| 代理公司： | 中科专利商标代理有限责任公司 | 代理人： | 王旭 |
| 地址： | 美国加*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本发明提供了用于检定α－甲基酰基－辅酶A消旋酶活性的方法。在所述检定中，将含有α－甲基酰基－辅酶A消旋酶或推测含有α－甲基酰基－辅酶A消旋酶的样品与(2R)－2－甲基酰基－辅酶A接触。如果α－甲基酰基－辅酶A消旋酶存在于所述样品中，则(2R)－2－甲基酰基－辅酶A转化成(2S)－甲基酰基－辅酶A。所述方法然后利用(2S)－2－甲基酰基－辅酶A和反式－2，3－脱氢酰基－辅酶A之间的循环反应体系而产生对应于α－甲基酰基－辅酶A消旋酶酶活性的可检测信号。也提供了基于相同原理的α－甲基酰基－辅酶A消旋酶检定用试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 循环 甲基 基辅 消旋酶 检定 | ||
【主权项】：
1.一种用于检定样品中α-甲基酰基-辅酶A消旋酶的方法，所述方法包含：a)将推测含有α-甲基酰基-辅酶A消旋酶的样品与(2R)-2-甲基酰基-辅酶A接触以产生(2S)-2-甲基酰基-辅酶A；b)在(2S)-2-甲基酰基-辅酶A转化酶和氧化形式的第一电子受体存在下，将如果产生的来自步骤a)的所述(2S)-2-甲基酰基-辅酶A转化成反式-2，3-脱氢酰基-辅酶A，由此产生第一电子受体的还原形式；在反式-2，3-脱氢酰基-辅酶A转化酶和还原形式的第二电子受体存在下，将所述反式-2，3-脱氢酰基-辅酶A转化回(2S)-2-甲基酰基-辅酶A而形成循环反应体系，由此产生第二电子受体的氧化形式；其中第一电子受体和第二电子受体是不同的；和c)评定所述循环反应体系中第一电子受体的还原或氧化形式或者第二电子受体的还原或氧化形式的浓度变化，由此确定样品中α-甲基酰基-辅酶A消旋酶的存在、不存在和/或数量。
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