[发明专利]枯草芽孢杆菌杀菌肽的体外表达及其方法无效
申请号: | 00102740.9 | 申请日: | 2000-03-03 |
公开(公告)号: | CN1274008A | 公开(公告)日: | 2000-11-22 |
发明(设计)人: | 徐庆;郭丽华;陈章良 | 申请(专利权)人: | 北京大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C07K14/32;C12Q1/18;C12Q1/68;A01N63/00 |
代理公司: | 北京大学专利事务所 | 代理人: | 孙博宁 |
地址: | 10087*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 利用生物技术的方法,根据杀菌肽LCI的氨基酸序列使用植物体偏爱的密码子人工合成了LCI的DNA基因片段。构建的质粒pBVAB16在大肠杆菌DH5α中高效表达LCI,占大肠杆菌总蛋白量的8.7%。大肠杆菌经离心、超声破碎、加热沉淀,以及离子交换和疏水作用液相色谱可以得到纯化的LCI。LCI能专门杀死水稻白叶枯病菌菌株G,最低有效浓度为2.5μg/ml。初步推断LCI是进入细菌体内,抑制了RNA的转录而引起细菌死亡。该基因可望用于植物抗病育种及特效菌肥的生产。 | ||
搜索关键词: | 枯草 芽孢 杆菌 杀菌 体外 表达 及其 方法 | ||
【主权项】:
1、一种枯草芽孢杆菌杀菌肽的体外表达及其方法,其特征在于所述方法包括:(1)杀菌肽LCI基因的化学合成及其克隆;(2)杀菌肽LCI表达载体的构建;(3)超表达的杀菌肽LCI的提取和纯化;(4)杀菌肽LCI的抗菌活性检测;(5)杀菌肽LCI对体外转录的抑制实验;(6)杀菌肽LCI的序列分析。
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